دانلود پایان نامه

دانلود پایان نامه

عنوان پایان نامه : پایان نامه استفاده ازماده ترت بوتيل هيدروپراکسايد  t-BHPیک مدل حیوانی از استرس اکسیداتیو به منظور مطالعه اثر آن در چگونگی بیان ژن Kdm5d(Smcy

 

از مقادیر 5/0 تا 2 میکروگرم می­توان برای سنتز cDNA استفاده کرد، ولی مقدار بهینه­ی RNA برای سنتز cDNA از روی آن، 1میکروگرم است.

روش کار:

1- 1 میکروگرم از RNA­ی تیمار شده با IDNase برداشته شده و به داخل یک ویال 5/1 میلی لیتری ریخته شد. سپس 1میکرولیتر پرایمر هگزامر تصادفی[1]، به آن افزوده شد.

2- توسط آب فاقد نوکلئاز، حجم داخل هر ویال به 12 میلی لیتر رسید.

3- ویال به مدت 5 دقیقه در دمای 70 درجه­ی سانتیگراد قرار داده شد تا واکنش اتصال پرایمر به RNA به خوبی صورت پذیرد.سپس مجددا ویال به روی یخ منتقل شد.

4- سپس به ویال مواد زیر اضافه شد:

جدول(3-5): مواد مورد استفاده در سنتزcDNA

نام ماده مقدار

3-8-5- روش انجام واکنش زنجیره­ای پلی مراز [2](PCR) جهت اطمینان از سنتز cDNA

مواد ذکر شده در جدول 3-5، داخل استریپ­های2/0 میکرولیتری به ترتیب اضافه شد و در انتها پیپتاژ گردید (مقادیر ذکر شده در جدول به ازای یک واکنش برای انجام PCR است). پرایمر مورد استفاده، Gapdh و هم چنین الگوی cDNA افزوده شده،cDNA  سنتز شده از RNA استخراج شده از بافت­ها بود که هر کدام شامل واکنش­های RT+ و RT بود و در استریپ­های جداگانه­ای تهیه شد. سپس استریپ­های حاوی مواد لازم برای PCR، به داخل دستگاه ترموسایکلر منتقل شد و دستگاه طبق برنامه دمایی جدول3-7 تنظیم گردید. در واقع در این مرحله براي ارزيابي آلودگي احتمالی نمونه های RT به DNA و نیز برای سنجش cDNA ساخته شده در ویال­های RT+، واکنش PCR با پرایمر اختصاصی ژن Gapdh، که يک ژن Housekeeping است، انجام شد.

[1]Random Hexamer

[2]Polymerase Chain Reaction (PCR)

 
 
 

 دانلود  رایگان فایل دموی این پایان نامه

 ( فقط حاوی صفحات فرد و حداکثر فقط 50 صفحه  با فرمت ورد ) :

پایان نامه استفاده ازماده ترت بوتيل هيدروپراکسايد t-BHPیک مدل حیوانی از استرس اکسیداتیو به منظور مطالعه اثر آن در چگونگی بیان ژن Kdm5d(Smcy

دانلود  رایگان فایل دموی این پایان نامه

 ( فقط حاوی صفحات فرد و حداکثر فقط 50 صفحه  با    فرمتPDF ) :

پایان نامه استفاده ازماده ترت بوتيل هيدروپراکسايد t-BHPیک مدل حیوانی از استرس اکسیداتیو به منظور مطالعه اثر آن در چگونگی بیان ژن Kdm5d(Smcy

 برای دیدن جزئیات بیشتر ، خرید و دانلود آنی فایل متن کامل با فرمت ورد می توانید به لینک زیر مراجعه نمایید:

دانلود از لینک زیر

پایان نامه کارشناسی ارشد استفاده ازماده ترت بوتیل هیدروپراکساید t-BHPیک مدل حیوانی از استرس اکسیداتیو به منظور مطالعه اثر آن در چگونگی بیان ژن (Kdm5d(Smcy

دسته‌ها: دسته اصلی